1.Kaj je celična kultura?
Celična kultura se nanaša na odstranjevanje celic iz živali ali rastlin in njihovo nato gojenje v ugodnem umetnem okolju.Celice je mogoče vzeti neposredno iz tkiva in razgraditi z encimskimi ali mehanskimi sredstvi pred gojenjem ali pa jih pridobiti iz uveljavljenih celičnih linij ali celičnih linij.
2. Kaj je primarna kultura?
Primarna kultura se nanaša na stopnjo kulture, potem ko so celice ločene od tkiva in se pod ustreznimi pogoji razmnožujejo, dokler ne zasedejo vseh razpoložljivih substratov (to je, da dosežejo sotočje).Na tej stopnji je treba celice subkultivirati tako, da jih prenesemo v novo posodo s svežim rastnim medijem, da zagotovimo več prostora za nadaljnjo rast.
2.1 Celična linija
Po prvi subkulturi se primarna kultura imenuje celična linija ali subklon.Celične linije, pridobljene iz primarnih kultur, imajo omejeno življenjsko dobo (tj. so omejene; glejte spodaj), in ko prehajajo, prevladujejo celice z največjo rastno sposobnostjo, kar ima za posledico določeno stopnjo genotipa v populaciji, ki je v skladu s fenotipom.
2.2 Celični sev
Če je subpopulacija celične linije pozitivno izbrana iz kulture s kloniranjem ali kako drugo metodo, bi celična linija postala celični sev.Celični sevi običajno pridobijo dodatne genetske spremembe po začetku starševske linije.
3. Omejene in neprekinjene celične linije
Normalne celice se običajno delijo le omejeno število krat, preden izgubijo sposobnost proliferacije.To je gensko določen dogodek, imenovan senescenca;te celične linije imenujemo končne celične linije.Vendar pa nekatere celične linije postanejo nesmrtne s procesom, imenovanim transformacija, ki se lahko pojavi spontano ali pa ga povzročijo kemikalije ali virusi.Ko se končna celična linija transformira in pridobi sposobnost neomejene delitve, postane neprekinjena celična linija.
4. Stanje kulture
Pogoji gojenja vsake vrste celic so zelo različni, vendar je umetno okolje za gojenje celic vedno sestavljeno iz primerne posode, ki vsebuje naslednje:
4.1 Substrat ali gojišče, ki zagotavlja bistvena hranila (aminokisline, ogljikove hidrate, vitamine, minerale)
4.2 Faktorji rasti
4.3 Hormoni
4.4 Plini (O2, CO2)
4.5 Urejeno fizikalno in kemično okolje (pH, osmotski tlak, temperatura)
Večina celic je odvisnih od sidranja in jih je treba gojiti na trdnem ali poltrdnem substratu (adherentna ali enoslojna kultura), medtem ko lahko druge celice rastejo lebdeče v mediju (suspenzijska kultura).
5. Kriokonzervacija
Če so v subkulturi presežne celice, jih je treba obdelati z ustreznim zaščitnim sredstvom (kot je DMSO ali glicerol) in shraniti pri temperaturi pod -130 °C (kriokonzervacija), dokler jih ne potrebujemo.Za več informacij o subkulturi in krioprezervaciji celic.
6.Morfologija celic v kulturi
Celice v kulturi lahko razdelimo v tri osnovne kategorije glede na njihovo obliko in videz (tj. morfologijo).
6.1 Fibroblastne celice so bipolarne ali multipolarne, imajo podolgovato obliko in rastejo pritrjene na substrat.
6.2 Epiteliju podobne celice so poligonalne, imajo bolj pravilno velikost in so pritrjene na matriks v ločenih lističih.
6.3 Limfoblastom podobne celice so sferične in običajno rastejo v suspenziji, ne da bi se pritrdile na površino.
7.Uporaba celične kulture
Celična kultura je eno glavnih orodij, ki se uporabljajo v celični in molekularni biologiji.Zagotavlja odličen modelni sistem za preučevanje normalne fiziologije in biokemije celic (kot so presnovne raziskave, staranje), učinkov zdravil in strupenih spojin na celice ter mutageneze in rakotvornih učinkov.Uporablja se tudi za pregledovanje in razvoj zdravil ter obsežno proizvodnjo bioloških spojin (kot so cepiva, terapevtski proteini).Glavna prednost uporabe celične kulture za katero koli od teh aplikacij je doslednost in ponovljivost rezultatov, ki jih je mogoče dobiti z uporabo serije kloniranih celic.
Čas objave: jun-03-2019