1. Izbira prave celične linije
Ko izbirate ustrezno celično linijo za svoj poskus, upoštevajte naslednja merila:
a. Vrste: Nečloveške in neprimatske celične linije imajo običajno manj omejitev glede biološke varnosti, vendar bo na koncu vaš poskus odločil, ali boste uporabili kulturo določene vrste.
b. Značilnosti: Kaj je namen vašega poskusa?Na primer, celične linije, pridobljene iz jeter in ledvic, so morda bolj primerne za testiranje toksičnosti.
c. Omejeno ali neprekinjeno: Čeprav vam lahko izbira med omejeno celično linijo zagotovi več možnosti za izražanje pravilne funkcije, je neprekinjene celične linije na splošno lažje klonirati in vzdrževati.
d. Normalne ali transformirane: Transformirane celične linije imajo običajno višjo stopnjo rasti in večjo učinkovitost sejanja, so kontinuirane in zahtevajo manj seruma v gojišču, vendar je bil njihov fenotip podvržen trajnim spremembam z genetsko transformacijo.
e. Pogoji in značilnosti rasti: Kakšne so vaše zahteve glede hitrosti rasti, gostote nasičenosti, učinkovitosti kloniranja in sposobnosti suspenzijske rasti?Na primer, za izražanje rekombinantnih proteinov z visokimi donosi boste morda morali izbrati celične linije, ki imajo hitro rast in sposobnost rasti v suspenziji.
f. Druga merila: če uporabljate omejeno linijo celic, ali je na voljo dovolj zalog?Ali je celična linija popolnoma označena ali morate to preveriti sami?Če uporabljate nenormalno celično linijo, ali obstaja enakovredna normalna celična linija, ki jo lahko uporabite kot kontrolo?Je celična linija stabilna?Če ne, kako enostavno ga je klonirati in ustvariti dovolj zamrznjene zaloge za vaš poskus?
2. Pridobite celične linije
Iz primarnih celic lahko zgradite lastno kulturo ali pa se odločite za nakup uveljavljenih celičnih kultur od komercialnih ali neprofitnih dobaviteljev (tj. celičnih bank).Ugledni dobavitelji zagotavljajo visokokakovostne celične linije, ki so skrbno testirane glede neoporečnosti in zagotavljajo, da je kultura brez kontaminantov.Priporočamo, da si ne izposojate kultur iz drugih laboratorijev, ker obstaja veliko tveganje kontaminacije celične kulture.Ne glede na izvor, se prepričajte, da so bile vse nove celične linije testirane na kontaminacijo z mikoplazmo, preden ga začnete uporabljati.
Čas objave: 1. februarja 2023